Патология печени

Занятие 31. Желтуха, причины и механизмы ее развития

Цель занятия

Изучить в эксперименте действие на организм составных частей желчи.

Подготовка к занятию

Студенты готовятся к данному занятию в объеме следующих вопросов.

1. Недостаточность функции печени и ее признаки.

2. Нарушения желчевыделительной функции печени и наблюдающиеся при этом расстройства.

3. Желтуха, виды желтух.

4. Методы получения экспериментальных желтух.

5. Болезненные явления при желтухах и их механизмы.

^* (Из расчета на одно рабочее место (2-3 студента).)

Наименование опытов и методика их проведения

Опыт 1. Механическая желтуха у собаки. У собаки за 2 недели до занятия выводят в кожный лоскут общую сонную артерию и за неделю до занятия перевязывают общий желчный проток. Во время занятия ведут общее наблюдение за состоянием животного, определяют цвет склер и слизистых оболочек полости рта, величину артериального давления, скорость свертывания крови, билирубин сыворотки крови и мочи (см. приложение), подсчитывают пульс.

Результаты наблюдения и исследований подробно протоколируют.

Опыт 2. Общетоксическое действие желчи на организм. Лягушке в лимфатический мешок (под кожу спины) вводят 1,5-2 мл желчи (бычьей). В течение занятия наблюдают за общим состоянием животного.

Опыт 3. Влияние желчи на скорость двигательного рефлекса у лягушки. Лягушку декапитируют и подвешивают за нижнюю челюсть на штативе. Через 5-10 минут после декапитации лапку лягушки опускают в слабый (0,2%) раствор соляной кислоты. Определяют время, через которое возникает двигательная реакция на раздражение кислотой (после каждого погружения лапки в кислоту необходимо тщательно отмывать лапку водой). После нескольких повторных раздражений устанавливают средний латентный период реакции.

Затем лягушке вводят в лимфатический мешок 0,5-1 мл цельной желчи. Через 15-20 минут после введения повторяют опыт с раздражением лапки кислотой. Результаты, полученные до и после введения лягушке желчи, сравнивают. Устанавливают увеличение латентного периода рефлекса после введения желчи.

Для решения вопроса, какая часть рефлекторной дуги поражена желчью, индукционным током от катушки Дюбуа - Раймона раздражают периферический и центральный отрезки отпрепарированного и перерезанного седалищного нерва.

Опыт 4. Влияние желчи на ритм сердечной деятельности у лягушки.

А. Обездвиженную лягушку прикрепляют к дощечке брюшком кверху, вскрывают грудную клетку и сердечную сорочку, обнажают сердце. Верхушку сердца при помощи серфинки соединяют с рычажком Энгельмана. Записывают ритм и амплитуду сердечных сокращений на ленте кимографа. Затем на сердце лягушки при помощи пипетки наносят несколько капель желчи в различных концентрациях (вначале в разведении 1:10, затем 1:5, 1:2, наконец, цельную желчь). После каждой аппликации сердце отмывают физиологическим раствором. Наблюдают урежение ритма сердечных сокращений.

Б. Вырезанное сердце лягушки помещают на часовое стекло с рингеровским раствором и подсчитывают количество сердечных сокращений за минуту.

Затем в раствор Рингера добавляют несколько капель (2-5) цельной желчи и еще раз подсчитывают сокращения. Устанавливают урежение ритма сокращений изолированного сердца. Сердце отмывают физиологическим раствором.

После восстановления нормального ритма сердечных сокращений на сердце наносят несколько капель (2-5) предварительно подогретой до 40-45°, а затем охлажденной желчи. Подогретая желчь теряет способность изменять ритм и силу сердечных сокращений. Это обусловлено тем, что желчные кислоты при нагревании разрушаются.

Опыт 5. Влияние желчи на внешнее дыхание у лягушки. У лягушки регистрируют исходное дыхание (серфинкой зажимают подбородочную область и соединяют с рычажком Энгельмана). Затем вводят подкожно 2 мл желчи и опять регистрируют дыхание.

Приложение. Определение билирубина в крови

Метод Гимане ван ден Берга основан на определении билирубина с помощью диазореактива Эрлиха. Различают прямую и непрямую реакции. При прямой реакции положительный результат появляется немедленно (или в пределах 30 секунд) в разведенной водной сыворотке; при непрямой - первая реакция дает отрицательный результат; положительный результат реакции наблюдается только в спиртовом растворе после обработки сывортки алкоголем.

Реактивы: 1) сульфаниловой кислоты 0,2 г + крепкой соляной кислоты (удельный вес 1,19) 3 г + дистиллированной воды 200 мл; 2) 0,5% раствор азотистокислого натрия. Перед определением смешивают 10 мл реактива 1 с 0,3 мл реактива 2.

Прямая реакция. Одну часть сыворотки смешивают с двумя частями воды, добавляют ¹/₄ объема свежей смеси диазореактива. При положительном результате наблюдается ясное розовое окрашивание жидкости, переходящее от добавления 1-2 капель крепкой соляной кислоты в сине-фиолетовое.

Непрямая реакция. Одну часть сыворотки смешивают с двумя частями 96° спирта, центрифугируют. С прозрачной жидкостью производят указанную реакцию.

Определение билирубина в моче

Реактивы: 1) 1% водный раствор сульфаниловой кислоты; 2) 1% водный раствор азотистокислого натрия; 3) крепкая соляная кислота (удельный вес 1,19).

В пробирку наливают по 1 мл реактива 1 и 2, смешивают их и разливают поровну в 3-4 пробирки, чтобы в каждой находилось около 0,5 мл смеси реактива. Затем в эти пробирки добавляют по 1, 2, 3 и 4 капли испытуемой мочи и взбалтывают. При наличии желчных пигментов жидкость окрашивается в красный цвет, переходящий в аметистовый от добавления 1-2 капель крепкой соляной кислоты. Реакция специфична для билирубина.

Проба на желчные пигменты

В пробирку наливают 1 мл мочи. Осторожно по стенке наслаивают такое же количество концентрированной азотной кислоты. На границе жидкостей при наличии пигментов образуется зеленое кольцо.