Занятие 21. Лейкоцитозы и лейкопении

Цель занятия

Изучить количественные и качественные изменения лейкоцитов при некоторых патологических состояниях.

Подготовка к занятию

Студенты готовятся к данному занятию в объеме следующих вопросов.

1. Лейкоцитозы и лейкопении: физиологические и патологические, перераспределительные и истинные. Рефлекторная и нервно-эндокринная регуляция лейкоцитарных реакций.

2. Лейкоцитозы: нейтрофильный, эозинофильный, лимфоцитарный и моноцитарный, их связь с определенными нозологическими формами и природой патологического процесса. Понятие о ядерных сдвигах. Индекс ядерного сдвига.

3. Лейкоцитарная формула как показатель функционального состояния системы крови. Понятие об относительном и абсолютном увеличении или уменьшении отдельных форм лейкоцитов.

^* (На группу в 10-12 человек.)

Наименование опытов и методика их проведения

Опыт 1. Изменение характера лейкоцитарной реакции на внутрибрюшинное введение молока у кролика на фоне действия новокаина. В опыт берут 2 кроликов одинакового веса.

Одному из них вводят внутрибрюшинно смесь 5 мл охлажденного кипяченого молока с 5 мл физиологического раствора.

Другому - смесь 5 мл молока с 5 мл 1% раствора новокаина. Количество лейкоцитов в периферической крови исследуют до опыта и трижды с интервалами в 30 минут после введения молока.

В протокольных тетрадях студенты вычерчивают лейкоцитарные кривые, полученные у контрольного и подопытного кроликов, и делают заключение о предполагаемом механизме изменения лейкоцитарной реакции у подопытного кролика.

Методика определения количества лейкоцитов (безмеланжерный способ)

Из прокола краевой вены предварительно обработанного эфиром уха кролика набирают 0,02 мл крови в гемометрическую пипетку и выдувают на дно пробирки, в которую заранее отмерено 0,38 мл 3% раствора уксусной кислоты. Пипетку трижды промывают. Смесь энергично встряхивают в течение 3 минут. Пипеткой для дистиллированной воды от гемометра каплю смеси вносят в счетную камеру. Лейкоциты подсчитывают в 100 больших квадратах сетки Горяева.

Количество лейкоцитов в 1 мм³ крови вычисляют по формуле:

где х - искомое количество лейкоцитов;

а - сумма лейкоцитов, сосчитанных в 100 больших квадратах;

б - количество сосчитанных малых квадратов (1 большой квадрат равен 16 малым);

в - разведение крови (в 20 раз).

Объем малого квадрата равен ¹/₄₀₀₀ мм³ (1 сторона - ¹/₂₀ мм; высота - ¹/₁₀ мм. Объем равен ¹/₂₀×¹/₂₀×¹/₁₀ = ¹/₄₀₀₀ мм³). Поэтому для приведения к 1 мм³ формула содержит множитель 4000.

Пример. В 100 больших (1600 малых) квадратах сосчитано 150 лейкоцитов.

В 1 мм³ будет:

т. е. сумму лейкоцитов, сосчитанных в 100 больших квадратах, нужно умножить на 50.

Приготовление смеси лейкоцитов для их подсчета можно проводить также обычным (меланжерным) способом. Кровь набирают до метки 0,5, разводящую жидкость - до метки 11, нанесенной на лейкоцитарном меланжере (разведение в 20 раз). В дальнейшем поступают так же, как при обращении с эритроцитарным смесителем.

Опыт 2. Экспериментальная пострадиационная лейкопения у крыс. За 5 суток до занятия крысу подвергают общему рентгеновскому облучению в дозе 600 г. Одним из непременных признаков возникновения лучевой болезни на определенной ее стадии является резкое падение количества лейкоцитов в крови.

На занятии демонстрируются также внешние признаки лучевого синдрома у крыс. Обращают внимание на геморрагии у глаз, носа, изменение шерстного покрова, диарею, похудание, изменение общего поведения (вялость).

Для подсчета лейкоцитов в крови у облученной крысы используется, как и в опыте 1, безмеланжерный способ.

Техника взятия крови у крыс

Крысу помещают в камеру. После обработки спиртом корня хвоста производят надрез скальпелем или бритвой одной из его боковых сторон над просвечивающей веной на глубину 1-2 мм. Первую каплю крови вытирают, вторую набирают до метки в мерную пипетку от гемометра. Дальнейший ход определения тот же, что и в опыте 1. При повторных взятиях крови надрезы производят на расстоянии 1-1,5 см от предыдущих по направлению к концу хвоста.

Изучение демонстрационных препаратов (мазков) крови

1. В мазках, выставленных под микроскопом к началу занятия, студенты изучают и зарисовывают нормальные и патологические формы лейкоцитов (нейтрофилы: сегментоядерные, палочкоядерные, юные, миелоциты; эозинофилы, базофилы, лимфоциты, моноциты, клетки раздражения, дегенеративные формы нейтрофилов с дегенеративными ядрами и токсогенной зернистостью в протоплазме).

2. Студенты получают от преподавателя по одному пронумерованному мазку с указанием числа лейкоцитов в 1 мм³ крови. Подсчитывают лейкоцитарную формулу и проверяют ее правильность по списку формул, находящемуся у преподавателя. После этого студенты делают заключение об изменении абсолютных количеств отдельных форм лейкоцитов и об особенностях лейкоцитарного сдвига.