Занятие 15. Лихорадка, причины и механизмы ее развития
Цель занятия
Показать значение неврогенных механизмов в развитии лихорадочной реакции.
Подготовка к занятию
Студенты готовятся к данному занятию в объеме следующих вопросов.
1. Определение понятия лихорадки.
2. Причины и механизмы развития лихорадочной реакции.
3. Роль нервной системы в механизме развития лихорадочной реакции.
4. Биологическое значение лихорадочной реакции для организма.
Техническое оснащение занятия*
* (Из расчета на группу или подгруппу студентов.)
Наименование опытов и методика их проведения
(Опыты рекомендуется ставить одновременно, что дает возможность более экономно расходовать животных: крыса в опыте 1 (с подкожным введением пирогена) может служить контролем для всех последующих опытов. Для постановки опытов студенты разбиваются на подгруппы в 2-3 человека. Каждая из подгрупп получает одно из указанных ниже заданий.)
Опыт 1. Экспериментальная модель лихорадки у животного. У предварительно взвешенной крысы измеряют температуру тела, частоту дыхания. Температуру тела животного измеряют термометром в прямой кишке, при наличии же электротермометра также и кожных покровов. Кончик термометра рекомендуется слегка смазывать вазелином и погружать в прямую кишку при повторных исследованиях всегда на один и тот же уровень.
После занесения в протокол исходных показателей подопытной крысе вводят подкожно в заднюю треть бедра убитую культуру В. mesentericus из расчета 0,5 мл на 100 г веса животного.
В дальнейшем наблюдают за состоянием и поведением крысы. Через каждые 15-20 минут у нее измеряют температуру тела, частоту дыхания.
Опыт 2. Роль нервной рецепции в механизмах развития лихорадочной реакции. Опыт ставят на 2 белых крысах одинакового веса; первой из них (контрольной) вводят подкожно в указанной выше дозе фильтрат убитой культуры бактерий, второй (подопытной) крысе вводят ту же дозу культуры бактерий после предварительной (за 10-15 минут) анестезии места введения 1% раствором новокаина. Новокаин в количестве 1 мл рекомендуется вводить не только подкожно, но и интракутанно. Через каждые 15-20 минут у животных измеряют температуру тела в прямой кишке.
Опыт 3. Значение различных рефлексогенных зон в реализации действия пирогенного раздражителя. В опыте используют 4 крыс одинакового веса. Одной из крыс фильтрат убитой культуры В. mesentericus вводят подкожно из расчета 0,5 мл на 100 г веса, другой - та же доза культуры в предварительно отпрепарированную бедренную вену, третьей - внутрибрюшинно, четвертой - внутрилегочно. В последнем случае прокол иглой грудной клетки делается справа в пятом - шестом межреберном промежутке по задней аксиллярной линии (избегать попадания культуры в плевру!). Температуру тела у животных измеряют до опыта и через каждые 15-20 минут после введения культуры бактерий в течение всего наблюдения.
Опыт 4. Влияние функционального состояния центральной нервной системы на развитие лихорадочной реакции. У 2 подопытных крыс одновременно изменяют функциональное состояние центральной нервной системы введением одной из них 0,05% раствора фенамина из расчета 1 мл на 100 г веса, другой - 2% раствора гексенала из того же расчета. В качестве контроля берут третью крысу, которой подкожно вводят соответствующий объем физиологического раствора. После того как у одной из крыс наступит состояние глубокого наркоза, всем 3 животным подкожно вводят одну и ту же дозу (0,5 мл на 100 г веса) убитой культуры В. mesentericus. Температуру тела у крыс измеряют до опыта и через каждые 15-20 минут после введения им пирогенного раздражителя. Полученные данные протоколируют, и после их анализа делают общее заключение по теме занятия.
Приложение. Приготовление бульонной культуры В. mesentericus
Посуду для приготовления бульонной культуры бактерий тщательно стерилизуют. Сухой штамм культуры микробов (1 ампула) разводят в небольшом количестве (3-5 мл) бульона и в равных объемах вносят пипеткой в приготовленные заранее колбочки со стерильным бульоном Хоттингера (по 50 мл в каждой). При наличии культуры бактерий, выросшей на косом агаре, в каждую колбочку с бульоном вносят по 2-3 капли смыва с него физиологическим раствором. Закрытые пробками из ваты колбочки ставят на 1-2 суток в термостат при температуре 38°. После этого колбочки с проросшей культурой автоклавируют в течение 30 минут при температуре 120°. Приготовленную указанным способом убитую бульонную культуру В. mesentericus следует хранить в холодильнике. При использовании культуры в опытах рекомендуется подогревать ее до температуры тела животного.